根据不孕不育的原因不同，针对性治疗有几种不同助孕方式，试管婴儿是核心技术，并无第几代之分，但老百姓习惯性的按技术难度划分，所谓第二代试管婴儿即单精子卵细胞胞浆内注射（ICSI）技术发展为男性因素不育重现生机，是男性梗阻性无精症治疗最直接的选择。显微镜下显微操作的体外受精---胚胎移植技术，也叫单精注射技术(ICSI)，它是由显微技术发展起来的显微镜下授精技术，人工直接将唯一一个精子注射入卵子细胞胞浆内并培育成胚胎。 海南医学院第一附属医院生殖中心卢伟英
其手术过程是通过一个玻璃穿刺针把精子穿过卵胞膜注入到卵子胞浆内。这需要极其高超的技巧和丰富的经验。因为每一个卵子只需要一个精子，即极少量的精液就足够了。 在大多数情况下，患无精子症的男性还是能够拥有自己的小孩的。我们把ICSI治疗推荐给所有对自己精子的生育能力有所怀疑的人。
第二代试管婴儿ICSI具体适应症如下：
1、精子数量少，计数每毫升少于500万只称严重少精症者。
2、精子活动性能低，无精子症者，生精功能障碍等，如输精管梗阻，而睾丸或附睾穿剌活检有精子；
3、反常的精子比例高，精子型态正常少于4%；
4、有精子抗体的男性；
5、逆行性射精（即射精在膀胱里面）
6、男性精虫顶体有缺陷者，如圆头精虫症 ；
7、精子穿透力有缺陷者；
8、卵子透明带太厚者（15-20μm） ，这也是最常见的原因之一；
9、不明原因不孕采取的试管婴儿（IVF）手术不受精的；
ICSI详细过程:
1. 使用促排卵药物刺激卵巢，让多枚卵泡同时成熟和脱落
2. 将促排后得到的卵子取出来等待受精
3. 处理精液，分离出精子细胞用于与卵子体外受精
4. 在高倍显微镜下挑选精子用于单精子注入
5. 使用ICSI技术让精子和卵子在实验室内受精结合成胚胎
6. 在实验室内培养胚胎，直至胚胎发育到适合着床的阶段
7. 将胚胎移植回子宫内
8. 移植后的剩余胚胎冷冻处理
第一步，卵子促排
在月经的第二或第三天，通过抽血化验检查女性体内性激素，评估卵巢功能，然后通过阴道超声波观察此次月经周期产生的基础卵泡数量。 为了让多枚卵子同时成熟脱落，一般使用注射型的促排卵药物。促排方案有很多种，需要根据病人情况采取个性化方案。
促排卵药物的种类大概分为2-3 种，期间还可能需要降调节，促排卵药物一共注射时间约为10-12天，在此期间通过检查荷尔蒙和超声波监测卵泡的发育， 最后通过测量卵泡大小来确定取卵日期，卵泡最少要达到18 mm 才适合取卵。确定取卵日期后注射HCG ，让卵子在36-37 小时后成熟和脱落。
第二步 ， 取卵
取卵的过程是经阴道Ｂ超引导，取卵针穿过阴道穹窿，直达卵巢吸取卵泡液传递给实验室人员在显微镜下找到卵子，然后将卵子移到培养液中，等待与精子受精，取卵时间不超过半个小时。
第三步，分离精子
男性在取精之前应该禁欲三天，但是不超过七天，采用手淫的方式取精。取精时使用试管婴儿专用的无菌杯，取精后半小时之内精液必须送至实验室进行精子分离处理，如果超过时间会降低精子与卵子的受精结合能力。经过分离挑选的精子在特殊的营养液中培养，增加其运动速度，提高受精结合能力。
精子的处理包括：使用密度梯度液的连续梯度离心法，收集沉淀下来的有生命力的精子，用于和卵子受精
第四步，挑选精子用于ICSI
在进行卵浆内单精子注入前需要从处理过的精子中再次挑选最有机会受精的精子用于注入卵内，一般使用IMSI或其他技术，详情请点击这里
第五步，卵浆内单精子注入受精
对于男性精子数量和质量低于标准的患者，如果将精子和卵子放在一起使其自行受精，精子和卵子不结合的风险很高，所以对于少精弱精的问题，应该采用第二代试管婴儿ICSI技术辅助受精，才能够得到更多的胚胎。挑选最有可能授精的精子，用微型针管将一个精子注入到一个卵子内。
第六步 ，胚胎培养
在温度适宜的胚胎培养箱内培养胚胎，使其能够从一个细胞依次分裂为两个、四个、八个细胞，此时的胚胎可以挑选移植回子宫，也可以继续培养使其发育至囊胚期胚胎 (Blastocyst)
第七步，胚胎移植
胚胎移植手术和一般的妇科检查相似，患者不需要任何麻醉或催眠，除非少数患者出现无法将医疗器具放入阴道或过于紧张焦虑，可使用安眠的药物，有助于胚胎移植的顺利完成。胚胎移植是采用非常细和软的胚胎移植管，将胚胎吸入管内，然后经过子宫口将胚胎放置于子宫内膜上腔内。移植过程中也可以使用超声波协助观察，有利于将胚胎放置在最合适的位置。
第八步，胚胎冷冻
胚胎冷冻技术，是现代试管婴儿成功率得以提高的关键。胚胎冷冻技术经过不断的发展完善，冷冻时间可长达多年，患者在多年后移植冷冻胚胎也同样有机会受孕，不需要重新促排。如果移植冷冻胚胎，女性内膜厚度与自然内膜相近，而移植新鲜胚胎，因为有促排卵药物的影响，可能会出现内膜过厚的问题，不适合胚胎的着床。所以相比较之下，对于促排后的卵子数量较多的患者，胚胎冷冻移植的成功率有可能高于新鲜移植。
